<html>
<head>
<style><!--
.hmmessage P
{
margin:0px;
padding:0px
}
body.hmmessage
{
font-size: 12pt;
font-family:Calibri
}
--></style></head>
<body class='hmmessage'><div dir='ltr'>Dear Carlos<BR>&nbsp;<BR>If you want to detect canine leish&nbsp;caused&nbsp;for&nbsp;Viannia subgenus, the primers designed by Lopez M, Inga R, Cangalaya M, Echevarria J, Llanos-Cuentas A, Orrego C, Arevalo J. Diagnosis of Leishmania using the polymerase chain reaction: a simplified procedure for field work. Am J Trop Med Hyg. 1993 Sep;49(3):348-56. PubMed PMID: 8396860.&nbsp; are better than others.<BR>We have used these primers with human and canine samples from cutaneous leish with excellent results.<BR>&nbsp;<BR>Regards<BR>&nbsp;<BR>Dr.&nbsp;Maxy De los Santos D<BR>Department of&nbsp;Parasitology<BR>U.S.Naval Medical Research Unit 6 (NAMRU-6)<BR>Lima-Perú<BR><br>&nbsp;<BR><div>&gt; Date: Sun, 20 Oct 2013 20:42:41 +0200<br>&gt; From: patrick.bastien@univ-montp1.fr<br>&gt; To: carloshlobo@gmail.com<br>&gt; CC: Leish-L@lineu.icb.usp.br; leish-l-bounces@lineu.icb.usp.br<br>&gt; Subject: Re: [Leish-l] primers for canine leishmaniasis<br>&gt; <br>&gt; Dear Carlos,<br>&gt; Have a look at three excellent papers by Lachaud et al. (JCM 2001, JCM  <br>&gt; 2002 and Parasitol. .2002). Although they seem old, there is a lot of  <br>&gt; valuable information in it, and the things have not changed much. The  <br>&gt; primers by Mary et al. and Chargui et al. seem to have improved this  <br>&gt; PCR. (Obviously, this is a personal opinion, and certainly many  <br>&gt; researchers can write other things)<br>&gt; If you cannot have access to the one in Parasitology, I can send it to you.<br>&gt; In brief, if you use a repeated nuclear DNA target, you will have a  <br>&gt; robust sensitivity that will enable you to detect most 'sick' animals.  <br>&gt; If you use the kinetoplast minicircle, you will get a  <br>&gt; 'hyper-sensitivity" that will allow you detecting all infected animals  <br>&gt; (including asymptomatic ones) but that will necessitate drastic  <br>&gt; working conditions (as you will be exposed to an extreme sensitivity  <br>&gt; to carry-over contaminations).<br>&gt; Although it has been used with success, I do not advise you to use a  <br>&gt; nested PCR for the same reasons.<br>&gt; In any case, you have to 'optimize' your PCR using first parasite  <br>&gt; promastigotes and then using seeded 'mimicked' samples.<br>&gt; Good luck !<br>&gt; and best wishes<br>&gt; P. Bastien<br>&gt; <br>&gt; Pr Patrick Bastien<br>&gt; Director, Departement de Parasitologie-Mycologie<br>&gt; Centre National de Reference des Leishmanioses<br>&gt; Vice-Director, "MiVEGEC" unit research UMR5290 CNRS/224 IRD/UM1/UM2<br>&gt; Faculte de Medecine, Université Montpellier 1<br>&gt; 39 Av. Charles Flahault<br>&gt; 34295 Montpellier cedex 5, France<br>&gt; <br>&gt; ----- Message de carloshlobo@gmail.com ---------<br>&gt;      Date&nbsp;: Thu, 10 Oct 2013 21:31:30 -0300<br>&gt;       De&nbsp;: Carlos Lobo &lt;carloshlobo@gmail.com&gt;<br>&gt; Répondre à&nbsp;: Carlos Lobo &lt;carloshlobo@gmail.com&gt;<br>&gt;   Objet&nbsp;: Re: [Leish-l] why is Leishmania donovani restricted to  <br>&gt; humans in Indian subcontinent?<br>&gt;        À&nbsp;: Tamrat Abebe Zeleke &lt;tabebezeleke@gmail.com&gt;<br>&gt;       Cc&nbsp;: Leish-L &lt;Leish-L@lineu.icb.usp.br&gt;, "Lawyer,   Phillip  <br>&gt; (NIH/NIAID) [E]" &lt;PhillipL@niaid.nih.gov&gt;,  <br>&gt; "leish-l-bounces@lineu.icb.usp.br" &lt;leish-l-bounces@lineu.icb.usp.br&gt;<br>&gt; <br>&gt; <br>&gt; &gt; Hello guys, good night.<br>&gt; &gt; I'm taking advantage of this opportunity to exchange scientific information,<br>&gt; &gt; much of which I have learned to ask for help.<br>&gt; &gt; I'll start a project on canine leishmaniasis in northeastern Brazil   <br>&gt; &gt; and I need<br>&gt; &gt; to diagnose, by PCR, dogs infected and not infected with Leish.<br>&gt; &gt; I've been doing some analysis of PCR for other experiments, but never did<br>&gt; &gt; for Leish, could someone give me some tips? Like which primer to use?<br>&gt; &gt; Should I collect blood or tissue samples to have more reliability?<br>&gt; &gt; Thank you.<br>&gt; &gt; Carlos Henrique<br>&gt; &gt;<br>&gt; &gt;<br>&gt; &gt; 2013/9/23 Tamrat Abebe Zeleke &lt;tabebezeleke@gmail.com&gt;<br>&gt; &gt;<br>&gt; &gt;&gt; Dear Carlos,<br>&gt; &gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt; I agree with the comment given by Phillip Lawyer. The molecular analysis<br>&gt; &gt;&gt; of strains or isolates from India, Kenya, and South Western Ethiopia also<br>&gt; &gt;&gt; supports this notion. However, the issue of distinct strains in Sudan and<br>&gt; &gt;&gt; North Ethiopia opts for the fact that East Africa may be the origin of at<br>&gt; &gt;&gt; least the naughty L. donovani strains circulating in the region.<br>&gt; &gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt; Tamrat Abebe<br>&gt; &gt;&gt; Addis Ababa University College of Health Sciences, School of Medicine ,<br>&gt; &gt;&gt; Department of Microbiology, Immunology &amp; Parasitology<br>&gt; &gt;&gt; Tikur Anbessa Hospital<br>&gt; &gt;&gt; Second floor room number 76<br>&gt; &gt;&gt; Tel: +251 911 447227(mobile)<br>&gt; &gt;&gt; Email: tamrat.abebe@aau.edu.et<br>&gt; &gt;&gt; *<br>&gt; &gt;&gt; *<br>&gt; &gt;&gt; *<br>&gt; &gt;&gt; *<br>&gt; &gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt; On Mon, Sep 16, 2013 at 4:37 AM, Lawyer, Phillip (NIH/NIAID) [E] &lt;<br>&gt; &gt;&gt; PhillipL@niaid.nih.gov&gt; wrote:<br>&gt; &gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;&gt; Dear Carlos,<br>&gt; &gt;&gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;&gt; For what it's worth, I believe it most likely happened the other way<br>&gt; &gt;&gt;&gt; around:  Leishmania donovani was probably introduced to East Africa from<br>&gt; &gt;&gt;&gt; India during the late 1800s when laborers were brought from India to work<br>&gt; &gt;&gt;&gt; in the Kenya building the railroad from Mombasa to Uganda and on other<br>&gt; &gt;&gt;&gt; infrastructure projects.  Leishmania donovani in East Africa is manifest as<br>&gt; &gt;&gt;&gt; kala azar and is anthroponotic, the same as in India.  The main vector in<br>&gt; &gt;&gt;&gt; Kenya is Phlebotmus martini, which tends to breed in termite mounds, often<br>&gt; &gt;&gt;&gt; associated with human dwellings.  Other Symphlebotomus species, Ph.<br>&gt; &gt;&gt;&gt; vansomerenae and Ph. celiae have also been implicated in L. donovani<br>&gt; &gt;&gt;&gt; transmission.<br>&gt; &gt;&gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;&gt; Regards,<br>&gt; &gt;&gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;&gt; Phil Lawyer<br>&gt; &gt;&gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;&gt; ________________________________<br>&gt; &gt;&gt;&gt; From: Carlos Brisola Marcondes [cbrisolamarcondes@gmail.com]<br>&gt; &gt;&gt;&gt; Sent: Friday, August 30, 2013 8:41 AM<br>&gt; &gt;&gt;&gt; To: Leish-L; leish-l-bounces@lineu.icb.usp.br<br>&gt; &gt;&gt;&gt; Subject: [Leish-l] why is Leishmania donovani restricted to humans in<br>&gt; &gt;&gt;&gt; Indian subcontinent?<br>&gt; &gt;&gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;&gt; Dear all,<br>&gt; &gt;&gt;&gt; Leishmania donovani seems to have been introduced from East Africa to<br>&gt; &gt;&gt;&gt; Indian subcontinent, where it has infected mostly humans, differently from<br>&gt; &gt;&gt;&gt; East African foci.<br>&gt; &gt;&gt;&gt;    Why does this occur? Is this caused by feeding preferences of<br>&gt; &gt;&gt;&gt; Phlebotomus argentipes, which bites mostly ruminants and humans and is<br>&gt; &gt;&gt;&gt; associated to houses? Or are dogs rarer in that region than in Brazil,<br>&gt; &gt;&gt;&gt; where these animals are important reservoirs of Leishmania infantum and<br>&gt; &gt;&gt;&gt; frequently bitten by Lutzomyia longipalpis?<br>&gt; &gt;&gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;&gt; Sincerely yours<br>&gt; &gt;&gt;&gt; prof. dr. Carlos Brisola Marcondes<br>&gt; &gt;&gt;&gt; Dept. Microbiol. Imunol. Parasitol./CCB<br>&gt; &gt;&gt;&gt; Federal University of Santa Catarina<br>&gt; &gt;&gt;&gt; Florianópolis (SC)<br>&gt; &gt;&gt;&gt; CV: http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4783901J2<br>&gt; &gt;&gt;&gt; blog: http://entomomedica.blogspot.com.br/<br>&gt; &gt;&gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;&gt; --<br>&gt; &gt;&gt;&gt; This email was sent by icb.usp.br   &shy;&shy;<br>&gt; &gt;&gt;&gt; _______________________________________________<br>&gt; &gt;&gt;&gt; Leish-l mailing list<br>&gt; &gt;&gt;&gt; Leish-l@lineu.icb.usp.br<br>&gt; &gt;&gt;&gt; http://lineu.icb.usp.br/cgi-bin/mailman/listinfo/leish-l<br>&gt; &gt;&gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;&gt; --<br>&gt; &gt;&gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;&gt; This email was sent by icb.usp.br<br>&gt; &gt;&gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt; --<br>&gt; &gt;&gt; * This email was sent by icb.usp.br *   &shy;&shy;<br>&gt; &gt;&gt; _______________________________________________<br>&gt; &gt;&gt; Leish-l mailing list<br>&gt; &gt;&gt; Leish-l@lineu.icb.usp.br<br>&gt; &gt;&gt; http://lineu.icb.usp.br/cgi-bin/mailman/listinfo/leish-l<br>&gt; &gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt; --<br>&gt; &gt;&gt; This email was sent by icb.usp.br<br>&gt; &gt;&gt;<br>&gt; &gt;&gt;<br>&gt; &gt;<br>&gt; &gt; --<br>&gt; &gt; This email was sent by icb.usp.br<br>&gt; &gt;<br>&gt; <br>&gt; <br>&gt; ----- Fin du message de carloshlobo@gmail.com -----<br>&gt; <br>&gt; <br>&gt; <br>&gt; _______________________________________________<br>&gt; Leish-l mailing list<br>&gt; Leish-l@lineu.icb.usp.br<br>&gt; http://lineu.icb.usp.br/cgi-bin/mailman/listinfo/leish-l<br>&gt; <br>&gt; --<br>&gt; <br>&gt; This email was sent by icb.usp.br<br></div>                                               </div></body>
</html>